Incluido en la revista Ocronos. Vol. V. Nº 11–Noviembre 2022. Pág. Inicial: Vol. V; nº11: 277
Autor principal (primer firmante): Belén Garrido Forns
Fecha recepción: 31 de octubre, 2022
Fecha aceptación: 26 de noviembre, 2022
Ref.: Ocronos. 2022;5(11) 277
Autores:
Belén Garrido Forns; María Isabel Gil Corral; María Pilar Diez Bueno; Cristina Ciria Bovio; Edgar Magrané Velasco; Yolanda Izquierdo Salicio
Palabras clave
Hemocultivo, microorganismo, microbiología, botella, Maldi-Tof
Introducción
Los hemocultivos son unos tipos de exámenes microbiológicos que permite la identificación del microorganismo en cuestión, ante la sospecha de una bacteriemia o fungemia. Este sistema nos ayudara a ajustar la terapia antimicrobiana acuerdo con el microorganismo causante de la infección y a su sensibilidad in vitro.
La detección de la presencia de bacterias u hongos es una de las grandes prioridades del Laboratorio de Microbiología, debido a que se caracteriza por una elevada mortalidad que oscila entre el 20 y el 50%.
Se comenzará por la obtención de la muestra, en este caso hablaremos de sangre venosa, mediante venopunción. Para ello necesitaremos 4 muestras, obtenidas de venas o lugares de punción distintas. Es muy importante realizar este proceso de forma aséptica, para evitar las contaminaciones, como también el volumen extraído de sangre, que debe ser suficiente, unos 8-10 mL. Y nunca se deberá rechazar una botella de hemocultivo debido a la gravedad que puede causar la infección.
El transporte al laboratorio debe ser inmediato, si no a 35-37ºC en estufa y debidamente etiquetados con su identificación legible y fácilmente comprensible.
Proceso analítico
Una vez, en el laboratorio, deberán ser incubados los hemocultivos unos 5 días en un sistema radiométrico, como es el BD BACTEC instruments blood culture systems. Este sistema se basa en la detección de CO2 que liberan los microorganismos cuando metabolizan los nutrientes existentes en el medio de cultivo que posee la botella de hemocultivo. El LED activa el material fluorescente que contiene la botella de hemocultivo y ésta es detectada por unos fotodetectores, encendiéndose una señal luminosa.
Así pues, el aparato va realizando su análisis cada cierto tiempo, hasta que aparece un hemocultivo positivo, donde el sistema ha detectado crecimiento de microorganismos en él.
Una vez detectado un positivo en el laboratorio procedemos a sacarlo del sistema y situarlo en una campana de extracción, siguiendo las normas de bioseguridad.
Realizaremos, lo primero de todo un Gram sobre una extensión de la muestra, que orientará al facultativo de una posible identificación u otra. Luego se procederá a hacer los subcultivos, si proviene de una botella incubada en atmósfera de anaerobiosis se cultivará en placa de agar sangre y otra de Schaelder, sin embargo, si es de una botella aerobia, se cultivará en una placa de agar chocolate y otra Mackonkey.
Procediendo a la lectura de estas placas a las 24 horas, excepto la de atmósfera anaerobia que necesitará de 2 a 3 días.
Y en caso de que haya sospecha de levaduras que hayan sido observadas en el gram, subcultivaremos en otra placa de Sabouraud la muestra de sangre del hemocultivo.
El siguiente avance de este proceso, una vez hayan transcurrido las 24 horas del subcultivo será el uso de la espectrometría de masas Maldi-Tof. Cogeremos una colonia de la placa que ha crecido y la pondremos sobre una superficie de metal, una especie de portaobjetos, y verteremos una pequeña porción de matriz, que ambas cocristalizarán allí cuando se evapore la mezcla. Introduciremos el porta en el Maldi- Tof, se formará una atmosfera en alto vacío y un lase ionizará la muestra.
Pasados unos minutos obtendremos el resultado informático que nos dictara si es un microorganismo u otro. Que será valorado por el facultativo y nos indicará si procedemos a realizar un antibiograma del microorganismo en cuestión o si realiza el informe definitivo para comunicar al médico facultativo encargado de administrar la terapia al paciente.
Conclusión
El diagnóstico precoz del hemocultivo es imprescindible en el laboratorio de microbiología debido a los aumentos de las septicemias y su mortalidad. Lo que hace concluyente su detección, la identificación del microorganismo productor y su susceptibilidad.
Bibliografía
- [citado el 6 de octubre de 2022]. Disponible en: http://file:///C:/Users/bgfor/ OneDrive/Desktop/ ARTICULOS/hemocultivos/ seimc-procedimientoHEMOCULT.pdf
- Revisión F/., Motivo P. Paho.org. [citado el 6 de octubre de 2022]. Disponible en: http://bvsper. paho.org/share/ goliva/PROPUESTAS/BD%20 MANUAL%202.pdf
- Uam.es. [citado el 6 de octubre de 2022]. Disponible en: https://www.cbm.uam.es/ images/servicios/ proteomica/ documentos/espectrometria- de-masas-MALDI-TOF.pdF