RESUMEN
El cáncer de mama es el cáncer más común en mujeres. La biopsia selectiva del ganglio centinela ha demostrado ser una técnica eficaz para la detección de metástasis ganglionares axilares, siendo un factor básico para el pronóstico.
AUTORAS: Ana Isabel Quiñones Valdes, Mercedes María Acha Diz, Paula Carpintero Fernández, María Teresa García Arias.
INTRODUCCIÓN
El método OSNA (one step nucleic amplification) consiste en la medición cuantitativa del ARN mensajero de la CK 19 presente en los ganglios linfáticos. La novedad de este sistema es que permite analizar la totalidad de ganglios durante el procedimiento quirúrgico, evitando que la paciente deba volver a someterse a una nueva cirugía para realizar el vaciamiento axilar si el análisis postoperatorio diera positivo. Asimismo, también permite determinar con más precisión y exactitud los ganglios que pueden estar afectados por células tumorales.
METODOLOGÍA
OSNA (ONE STEP NUCLEIC AMPLIFICATION) se basa en:
- Deteccioón intraoperatoria de metástasis en los ganglios linfáticos de pacientes con cáncer de mama.
- Marcador: CK 19 (marcador de células epiteliales)
- Medición cuantitativa del ARN mensajero de la CK 19 en los ganglios linfáticos.
- Identificación de micrometástasis y macrometástasis.
Es recomendable realizar inmunohistoquímica de CK 19 en la biopsia previa del tumor para asegurar que el tumor expresa el marcador. Entre el 1-2% de la población no expresa CK 19. También se recomienda incluir la grasa, (que se obtiene repelando el ganglio), en parafina para confirmar la ausencia de tejido ganglionar.
El método OSNA se basa en la tecnología RT-LAMP (Loop Mediated Isothermal Amplification) que consiste en la transcripción reversa de ARN y amplificación del ADN sin purificación previa mediante la detección indirecta a tiempo real por turbidimetría.
Todo ello se lleva a cabo mediante el equipo RD-100i al que deberá realizarse en primer lugar una calibración que permite comprobar y preparar el equipo hasta la recepción de la muestra. La muestra debe llegar al servicio de anatomía patológica en el menor tiempo posible y preferiblemente en hielo.
Este equipo permite analizar hasta 4 ganglios linfáticos en aproximadamente 30 minutos. Los resultados del análisis se expresan en número de copias:
- 5000 o más copias (++) corresponde a MACROMETÁSTASIS
- 2500 a 5000 copias (+) corresponde a MICROMETÁSTASIS
- Menos de 2500 (-) corresponde a resultado NEGATIVO.
OBJETIVOS
Optimizar el tratamiento quirúrgico de pacientes con cáncer de mama mediante la detección intraoperatoria de metástasis en los ganglios linfáticos:
- Analizando el ganglio completo.
- Evitando segundas intervenciones.
- Evitando análisis postoperatorios.
CONCLUSIONES
Podemos concluir que el método OSNA es una técnica molecular recomendable siendo un procedimiento cualitativo y cuantitativo altamente específico basado en el análisis por amplificación del ARN de la CK 19 que permite distinguir el tamaño de las metástasis.
El nivel de expresión del ARN-CK 19 se correlaciona con el volumen de metástasis.
La determinación de la carga tumoral total, definida como el número de copias de ARNm de CK19 presente en todos los ganglios centinela, permite predecir el número de ganglios axilares afectados en el resto del tejido axilar sin efectuar la linfadenectomía y establecer el estadio del tumor del que dependerá la estrategia terapéutica posterior.
La misma metodología de estudio molecular de los ganglios linfáticos será probablemente aplicable a otros carcinomas que expresen CK19. Se han publicado ya algunos estudios en cáncer de colon y en carcinomas de cabeza y cuello.
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